地衣類化学成分の顕微結晶法（MCT）ー２（キウメノキゴケ）

 前回の挑戦はこちら

今回は、 キウメノキゴケと思われる地衣類で、MCTにトライしてみました。（結果は思わしくない）

 

 アセトンで地衣成分抽出

これにGE液を付けたカバーグラスをかぶせ、ライター（今回はターボライター）で加熱。

チャッカマンからターボライターに代え、煤は無くなったが火力が強くなり加熱時間の調整がさらに難しくなったように思う。

大村先生の動画では、Usnic acid (appears immediately), Caperatic acid (appears slowl: ca 10 min. or so) が美しく映っている。　が、こちらでは、はっきりこれだと言えるような結晶が見えない。３回、加熱時間を少し変えるなどしてやってみたがどうもうまくいっていないようだ。(?)

追記：大村先生から、「いいんじゃないでしょうか？ウスニン酸とカペラート酸。」とのコメントをいただきました。！ 　それなりに出来ていたということかなと、、、。

 

これがウスニン酸？？？

100倍

300倍

形は似ているが、色が黄色っぽくない。別のものか？

追記：ウスニン酸だろうとのコメントをいただきました。

これがカペラート酸？？？

300倍

 

300倍

100倍

単なるゴミのようにも見え、よくわからない。この顕微鏡では無理なのか？

追記：カペラート酸に見えるとのコメントをいただきました。

その他、何らかの結晶

100倍

100倍

100倍

100倍

 

スケール

直尺の0.5 mm 間隔の目盛を「100倍」で見たもの。上のいくつかの写真には、だいたいの目安としてこれから計算したスケールを付けた。

100倍

うまくいかない（？）　原因として考えられる点

• 加熱、冷却の仕方が悪い
• GE試薬の質が悪い（試薬用ではないものを使用）
• GE試薬の劣化（今回は作ってから数日経過している）
• 顕微鏡がダメ（特にCaperatic acidを見るのは厳しい？）
• 資料がキウメノキゴケではなかった 
• ？？？

 

追記（2022.2.27）プロトセトラール酸？

 大村先生のTwiiter投稿「キウメノキゴケから抽出しプロトセトラール酸のGE結晶」を参考に、再度見直してみた。それらしき、下のものを見つけた。丸くて黒いだけのようだが、よく見ると細かい毛のようなものがあるようです。「良さそうにみえます」とコメントしていただきました。

 

参考：

YouTube　かはくチャンネル『Microcrystal Tests for Lichen Substances/地衣類化学成分の顕微結晶法』 https://www.youtube.com/watch?v=2IoUzuuf8Ww

大村嘉人「街なかの地衣類ハンドブック」（文一総合出版）

吉村庸「原色日本地衣植物図鑑」（保育社）

 

 

地衣類化学成分の顕微結晶法（MCT）

 

「街なかの地衣類ハンドブック」などにやり方が出ていますが、家でやるのはちょっと難しいと思っていました。が、

大村先生の動画　YouTube　かはくチャンネル

『Microcrystal Tests for Lichen Substances/地衣類化学成分の顕微結晶法』

かはく【国立科学博物館公式】 

を見て、実際のやり方がわかったような気がしてきたので挑戦してみました。

用意したもの

以下を某通販サイトにて購入（計4,000円ぐらい）

　　　　薬品類：アセトン（ネイルカラーなどのリムーバー）

　　　　　　　　グリセリン（皮膚の保湿剤用）

　　　　　　　　氷酢酸（掃除用）

　　　　スライドグラスとカバーグラスのセット

　　　　スポイト付きガラス瓶 （アロマオイル用）

顕微鏡：数年前に実家の押し入れから掘り出してきた、小学生の頃に買ってもらった骨董品のような物

その他 ピンセット、ライター（チャッカマン）など

カメラはオリンパスTG-6を使用

 

再結晶用の試薬　GE　を用意する

　 氷酢酸３, グリセリン1 ぐらいの割合でスポイト付きガラス瓶に入れて混ぜた。

　氷酢酸でむせた。氷酢酸はそれなりに危険かもしれない。（要換気）

 

地衣成分の抽出

コフキメダルチイと思われる地衣類の付いたケヤキの樹皮（地面に落ちていたもの。つくば市大穂）

カッターで剥がして二つの小片をスライドグラス上に置く。

アセトンをかける。写真は小片を裏返したところ

数分間そのまま乾くまで待つ。（要換気）

小片に地衣類だけでなく樹皮もついていたためかちょっと汚い。

カッターナイフの刃でスライドグラス表面の付着物をこそげて、中心部に集める。明らかなごみはできるだけ取り除いたが、全体に茶色っぽく汚い。これで結晶ができるのかどうか心配だが仕方ないのでそのまま続行。

 

試薬に溶かす

ここがちょっと難しいなと思ったところ。

カバーグラスにGE試薬を付けて、集めた付着物の上にかぶせる。先生の動画と比べると試薬の量が多すぎたようだ。

ライター（チャッカマン）でスライドグラスの下から試薬の部分をあぶり、一瞬だけ沸騰させて止める。 ちょっとやりすぎたか？　（これをやるときは、アセトンは片づけておこう）

スライドグラスに煤が付いたのでティッシュでふき取る。ターボライターを使えばススが出ないとのこと（大村先生に教えていただきました）。

試薬が多すぎたせいで、カバーグラスの外に液が浸み出してきてしまったが、そのまま続行。

顕微鏡で結晶らしきものがあるかどうか探すが、数分間はよくわからない。

５分後（？）ぐらい、「これかな～」というものがちらほら見える。

（以下の写真はTG-6 の顕微鏡モードで顕微鏡をのぞいて撮影）

 さらに５分経過（あぶってから約１０分）、

 あぶってから約３０分後の同じ場所。結晶が成長した❕

 翌日

同じ場所。光の具合が違うが、特に変化は見られない。

小さな粒粒がたくさん見えるが、これらはレンズの汚れ。

 

 

 全体を探すと、いろいろな形のものがたくさん見つかった。楽しい。

下の写真の結晶は大村先生から「アトラノリンの結晶のよう」だと教えていただきました。

 

少なくとも２種類おそらく３種以上の結晶があるように見える。これらが何なのか判定するのは素人には難しそうだが、もう少し調べてみる。

 とりあえず、地衣成分の結晶を観察することができた！のではないかと思う。結晶を作るだけなら、思っていたより簡単だった。

 

追記：

最後のの写真は先生から「アトラノリンの結晶のよう」だと教えていただきました。が、他のものについて「原色日本地衣植物図鑑」などで調べ、「これかな～」と思うものもあり、違っているようでもあり、何の結晶かを判断することはできませんでした。今回は、とりあえず結晶が見られたことだけで良しとしようかと思います。

 

他の地衣類でもやってみたい。

新しい顕微鏡が欲しいが、どういうのがいいのか見当がつかない。

他の試薬、oT, KK は危険度が高そう、、、（o-Toluidine, 5% KOH, 20%K2CO3, 毒性あり、通販では手に入らない？）

 

参考：

YouTube　かはくチャンネル『Microcrystal Tests for Lichen Substances/地衣類化学成分の顕微結晶法』 https://www.youtube.com/watch?v=2IoUzuuf8Ww

大村嘉人「街なかの地衣類ハンドブック」（文一総合出版）

吉村庸「原色日本地衣植物図鑑」（保育社）